Doctorat en Sciences médicales - Toxicologie - Université française du Pacifique (Polynésie française), 111 p.
Abstract
La ciguatéra est un ichtyosarcotoxisme spécifique des écosystèmes coralliens des zones intertropicales. En Polynésie française, les phycotoxines responsables de la ciguatéra sont des mélanges complexes de polyéthers composés de plus d'une vingtaine d'analogues. La purification suivie de la caractérisation chimique et pharmacologique sont des étapes fondamentales pour répondre à la mise en oeuvre de traitements efficaces ou de moyens de détection des poissons toxiques. Dans le but de participer à la résolution de ces problèmes de prévention, notre contribution s'est articulée selon trois axes.
Evaluer l'affinité pour le canal sodium activé par le potentiel de huit ciguatoxines (CTXs) par des expériences de compétition sur des synaptosomes de cerveaux de rats avec la brévétoxine [3H]PbTx-3. Toutes les CTXs testées ont la propriété de se lier au canal sodium avec une forte affinité. Les faibles différences structurales entre ces analogues conduisent cependant à d'importantes différences d'affinité (0.041 à 3.9nM).
Evaluer la toxicité aiguë sur la souris et les effets dépendants du sodium sur des cellules neuronales de souris et sur la fibre nerveuse myélinisée de grenouille. Les huit CTXs testées par injection ip induisent des symptômes semblables mais leur DL50 varie de 0.33 à 18 μg/kg. Les CTXs comme les PbTxs induisent un gonflement du noeud de Ranvier par un phénomène osmotique corrélé au flux d'ions sodium. Les CTXs et les PbTxs, à des doses actives sur les canaux sodium neuronaux, ne montrent aucun effet cytotoxique alors qu'elles induisent une cytotoxicité dose dépendante notable lorsque les systèmes de régulation ioniques actifs sont bloqués par l'ouabaïne et/ou lorsque les canaux sodium sont activés par la vératridine.
Etudier la faisabilité d'un test de détection des poissons toxiques. L'application de la technique d'interaction ligand-récepteur à des extraits de poisson donne des résultats parfaitement corrélés au test souris. Ce protocole s'avère applicable avec une très bonne sensibilité au dosage des CTXs dans une matrice lipidique.
L'étude comparative d'un panel de CTXs et PbTxs, tant sur le plan de leurs caractéristiques biochimiques que toxiques a permis de réaliser une première étude des relations structure-activité des toxines polyéther spécifiques du site 5 des canaux sodium activés par le potentiel.